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念珠菌顯色培養(yǎng)基根據(jù)酶底物法,通過顯色來區(qū)別不同念珠菌,30-35℃培養(yǎng)24-72小時(shí)后,白色念珠菌顯綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
成份(g/L)
胨 | 10.2 |
氫罌素 | 0.2 |
色素 | 22.0 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 6.3±0.2 25℃ |
此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得z佳的結(jié)果。
檢驗(yàn)原理
蛋白胨提供碳氮源;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;抑制劑抑制雜菌的生長(zhǎng);色素對(duì)應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng),水解底物,釋放出顯色基團(tuán)
用法
稱取本品 9.7g(可按 4.85g/100ml 的比例擴(kuò)大或縮小),加入 200ml 蒸餾水或純化水中,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘。將加熱后的培養(yǎng)基水浴冷卻至 45-50℃,輕輕地?fù)u勻,傾入無菌平皿(9cm 的 15ml/皿,7cm 的 10ml/皿),瓊脂*凝固后,備用。
操作步驟
1、按中國藥典方法制備樣品液;
2、取樣品液接種至適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng);
3、將疑似菌落接種至念珠菌顯色培養(yǎng)基平板上,30-35℃培養(yǎng) 24-72 小時(shí)。白色念珠菌典型特征為綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
4、對(duì)可疑白色念珠菌菌落應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行適宜的鑒定試驗(yàn)。
質(zhì)量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動(dòng)性,呈淡黃色。制備好的平板呈淡黃色透明固態(tài)。
2、微生物試驗(yàn)
在 30-35℃ 培養(yǎng) 24-72 小時(shí):
質(zhì)控菌株 | ATCC | 生長(zhǎng)情況 | 菌落顏色 |
白色念珠菌 | CMCC(F)98001 | +++ | 綠色 |
熱帶念珠菌 | ATCC13803 | +++ | 藍(lán)灰色 |
克柔假絲酵母菌 | ATCC14243 | +++ | 紫粉色 |
光滑念珠菌 | ATCC15126 | +++ | 淡紫色-紫色 |
其它念珠菌 | / | +++ | 白色 |
大腸埃希氏菌 | CMCC(B)44102 | - | 抑制 |
方法的局限性
本培養(yǎng)基鑒定白色念珠菌,少數(shù)情況下可能會(huì)出現(xiàn)假陽性或假陰性,需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。
典型特征
白色念珠菌典型特征為綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
貯存
制備好的平板應(yīng)立即使用,應(yīng)避免光線直接照射。干粉培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
念珠菌顯色培養(yǎng)基(1000ml)微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置25-30℃需氧培養(yǎng)48-72小時(shí)。
注:回收率計(jì)算時(shí),用SDA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。
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